Bioss的GLASS gel 中型预制胶(Tris-Gly)是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于PAGE和Western Blot检测。
产品特点:
采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。
采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐,清晰。
电泳时间短,使用超快电泳缓冲液,在220V电压下,电泳20min 即可完成。
胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开。
凝胶中不含SDS,可用于变性和非变性电泳。
兼容市场上主流的Mid电泳槽,如Bio-Rad, Invitrogen。
中型凝胶尺寸,更多上样孔数,便于分析蛋白样品。
提供多种浓度的均一胶和梯度胶(6%,8%,10%,12%,15%,4-15%,4-20%)。
也可以提供特殊浓度的定制服务。
注:使用荧光上样缓冲液处理过的样品,无需剥胶,无需经过染色脱色处理,即可直接在紫外灯或者LED灯下观察到蛋白条带。配合超快电泳缓冲液使用,可在半个小时内完成样品处理、电泳、拍照的全部过程,获得理想的电泳结果。
基本信息:
|
胶板尺寸: |
宽×高×厚度为150×103×5.3mm |
凝胶厚度: |
1.5mm |
|
凝胶尺寸: |
宽×高×厚度为133×87×1.5mm |
孔数: |
26孔 |
|
Acr-Bis: |
29:1 |
最大上样量: |
30μL |
|
浓缩胶: |
4%,1.5cm |
包装: |
5片/盒 |
保存条件:2-8℃保存,有效期12个月。请勿置于0℃以下,否则会冻凝,产生气泡和裂纹导致报废。
常温运输,常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射。
产品规格(预制胶选择指导):
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产品编号 |
浓度 |
孔数 |
最大上样量 |
电泳液 |
转膜液 |
分离范围 |
建议电压 |
|
C53049 |
6% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
60-200kDa |
180V |
|
C53050 |
8% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
40-200kDa |
180V |
|
C53051 |
10% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
20-160kDa |
180V |
|
C53052 |
12% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
15-85kDa |
180V |
|
C53053 |
15% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
10-50kDa |
180V |
|
C53054 |
4-15% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
20-200kDa |
180V |
|
C53055 |
4-20% |
26孔 |
30μL |
Tris-Gly |
Tris-Gly |
5-200kDa |
180V |
使用说明:
非变性胶(Native-PAGE)
1.非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响,建议实验前进行预实验。
2.将GLASS gel 中型预制胶 Tris-Gly从包装袋中取出。
3.将预制胶固定在电泳槽中。
4.准备非变性电泳缓冲液:取 1000mL 1× Tris-Gly非变性电泳缓冲液。
5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低 须加到1/3液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。
6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。
7.上样:将非变性蛋白样品与 5× 非变性 Loading buffer 进行 4:1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。
8.电泳条件:180 V, 70 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)
10.酸性蛋白(等电点pI<7)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点pI>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳。
变性胶(SDS-PAGE)
1.请参考分离谱图选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。
2.将GLASS gel 中型预制胶 Tris-Gly从包装袋中取出。
3.将预制胶固定在电泳槽中。
4.准备电泳缓冲液:取 1000mL 1× Tris-Gly变性电泳缓冲液。
5.内槽加满电泳液,外槽的电泳液最低须加到1/3液面处,最高不可漫过胶板,再缓慢地将梳子拔出。
6.上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。
7.上样:将蛋白样品与 5× 变性Loading buffer进行4:1混合均匀,加热处理。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。
8.电泳条件:180 V, 70 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。
9.电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取凝胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)
拆胶建议:
1.先沿侧边胶处简单划一刀(或先将玻璃板侧边多余封胶材料去除);
2.用刀在侧边胶处,沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料(箭头处),轻轻打开玻璃板;
3.取胶时,需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀,防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。
GLASS gel 中型预制胶兼容的电泳槽:
a.Life SureLock Tandem 中型胶电泳槽;
b.Life XCell4 SureLock 中型胶电泳槽;
c.Bio-Rad Criterion 电泳槽;
或其它胶板宽度在15厘米的电泳槽。
注意事项:
1. Bioss的 Tris-Gly预制胶使用的是中性的Tris-Gly缓冲系统。
2.如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100-120V,适当延长电泳时间。
3.电压为180V电泳时,1块胶的电流在75mA左右,2块胶的电流在150mA左右,随时间增加电流逐步降低。
4.如要重复使用电泳缓冲液,建议每次更换内槽电泳缓冲液,外槽根据电泳实际情况更换。为了保证最佳电泳效果,不建议重复使用电泳缓冲液。
5.为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度等因素都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。
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蛋白分子量 |
100kDa以上 |
10-100kDa |
10kDa以下 |
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建议甲醇浓度 |
5% |
10% |
20%-30% |
6.如需分离<10 kDa的蛋白,建议使用Tricine体系预制胶。
7.如需分离>300 kDa的蛋白,建议使用Tris-Acetate体系预制胶。
8.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
9.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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